做实验、搞钱、文章、学识点,充实且快乐。
“这张照片拍得怎么样?”洛听竹拍完后,问方子业。“蛋白含量高的话,可能是前期的文献准备没有确定好,我认为最有可能的是因为一抗浓度太高,作用时间太长引起。”
原理听起来颇为复杂,但其实真正要操作的时候,主要的步骤主要是以下几步。
经过page分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分……
而方子业此时,看着学识点飞跳动到了134,一下子增加了足足七十点的学识点,也是知道啊,这一次的B实验,在这一个课题之中的作用占比不小,可能是支撑整个课题规模的小骨架了。
“好,B好好跑。”袁威宏交待,仿佛是在给方子业暗示,方子业在做什么,他都了然于心。
最后呈现出结果后,洛听竹欣喜异常:“方师兄,你今天这个条带显示很清楚欸,上一次范师兄跑出来的是哑铃状的。”
众所周知,糖酵解是糖转化为能量的第一步,没有糖酵解的第一步,葡萄糖和果糖想要被正常利用,是几乎不可能的事情,而如果依靠酮体等旁路作为有氧氧化的底材,肯定无济于事。
制作标准曲线之后,就可以让自己处理的细胞产生的‘运动员’开始上赛道了。
不过,方子业反正已经下了门诊,来到实验室里,就一步一步地按部就班来做。且旁边还有洛听竹帮点小忙。
学识点的余额,一下子又累积到了6o之多,还可以增加一个3级技能的同时,今天晚上,方子业还有细胞实验,即将收获,到时候观察结果,肯定又是一笔不菲的学识点。
紧接着是电泳、转模、免疫反应、显影等等一系列后,通过特殊的抗体和试剂,就能够显示目标蛋白的胶片。将胶片进行扫描或拍照,用凝胶图象处理系统分析目标带的分子量和净光密度值……
这个过程很复杂,也相对漫长,更需要耐心。
门诊完,方子业就又得到了15点左右的学识点,这一下,即便是加点打结术到了3级,给老师送礼物。
“那如果有条带拖尾呢?”洛听竹想了一下,又问了一个问题,应该是她跟着别人做的时候,看到过这样的情况。
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“应该差不多吧,条带的厚度灰度差距还是蛮明显的。拍个照,拍个照……”方子业赶紧让洛听竹也帮忙拍一张。
“呈哑铃状一般配置胶有问题,另外还有一种可能是样品中含有太多杂质,没有离心下来,然后杂质沉积在孔的中间,蛋白自然被推挤到两边。”
hk2与b-anet(肌动蛋白)内参两个条带,共有过表达、正常以及沉默三个组。
“你这张图,直接用prism进行作图就可以用了吧?”洛听竹继续问。
然后就是清理实验台并清洗相应的实验器材了。
一切结束,方子业建议:“洛师妹,辛苦了,一起去吃个宵夜吧?”
洛听竹这会儿正在左右翻看着B成图的照片,歪着头点了一下:“好呀。”
……
(本章完)